GB/T 16258－1996
Test method for sugar in cotton fibers －Quantitative method
国家技术监督局 1996－03－28批准 1996－06－01实施
1 范围
本标准规定了用3，5－二羟基甲苯－硫酸溶液作显色剂，使用分光光度计定量测定棉花含糖量的试验方法。
本标准适用于棉纤维所含全糖的定量测定。
2 引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB 6097－85 棉纤维试验取样方法
3 定义
本标准采用下列定义。
3.1 含糖率 percentage of sugar
附着在棉纤维表面总糖(包括还原糖、非还原糖)重量占棉纤维试料重量的百分率。
3.2 精密度 percision
在确定条件下，将测试方法实施多次所得结果之间的一致程度。
3.3 回收率 recovery
在同一条件下，将已知量的标准物加入到待测物中进行测定，其结果扣除待测物的本底值后与标准物加入量之比。
4 原理
在非离子表面活性剂的作用下，使棉纤维上的糖溶于水中，糖在强酸性介质中转化为醛类，与3，5－二羟基甲苯发生显色反应，生成橙黄色化合物，用分光光度计在λ=425nm处与标准工作曲线比较定量。
5 试剂和材料
5.1 蒸馏水。
5.2 硫酸(密度1．84g／mL)。
5.3 3，5－二羟基甲苯。
3，5－二羟基甲苯－硫酸溶液(0．2％，W／W)：称取3，5－二羟基甲苯(5．3)0．2g，置于100mL烧杯中，加入100g(约54mL)硫酸(5．2)，搅拌使之全部溶解。现用现配。
5.4 脂肪酸烷醇酰胺(尼纳尔)(工业级)。
5.4.1 测定用脂肪酸烷醇酰胺(0．04％)溶液
称取0．4g脂肪酸烷醇酰胺(5．4)溶于1000mL(5．1)水中，搅拌均匀。
5.4.2 提取用脂肪酸烷醇酰胺(0．005％)溶液
量取测定用脂肪酸烷醇酰胺溶液(5．4．1)100mL，溶于700mL水(5．1)中，搅拌均匀。
5.5 D－果糖。
5.5.1 糖标准储备溶液
称取D－果糖(5．5)0．200g，用水(5．1)溶解后，转入100mL容量瓶中，用水(5．1)稀释至刻度。浓度为2．0mg／mL。
5.5.2 糖标准工作溶液
用移液管吸取0．5，1．0，1．5，2．0，2．5，3．0，4．0，5．0mL糖标准储备溶液(5．5．1)，分别注入50mL容量瓶中，用水(5．1)稀释至刻度，该糖标准系列浓度分别为0．020，0．040，0．060，0．080，0．10，0．12，0．16，0．20mg／mL。
6 主要仪器及器具
6.1 分光光度计：波长范围200～800nm。
6.2 天平：分度值0．01、0．001g。
6.3 振荡器：>200次／min。
6.4 恒温水浴锅。
6.5 250mL磨口具塞锥形瓶。
6.6 1cm玻璃比色皿。
6.7 移液管：1mL，2mL，5mL，符合GB 12807－91，A级。
6.8 容量瓶：50mL、100mL，符合GB 12806－91，A级。
6.9 25mL比色管。
7 样品
7.1 按GB 6097规定抽取实验室样品。
7.2 从实验室样品中随机抽取不少于15g的试验样品。
7.3 将试验样品中去除粗大杂质，充分混合(或用混样品)，从中称取3份作为试料，每份试料重2．0g±0．1g。余样备用。
8 分析步骤
8.1 试样溶液的配制
取3份试料(7．3)，分别置于250 mL锥形瓶中。加入0.005％脂肪酸烷醇酰胺溶液(5．4．2)200mL，在振荡器上振荡10min。用玻璃棒将棉花翻过后，继续振荡10min，用定量滤纸过滤，得到3份试料溶液。
8.2 空白试验
8.2.1 吸取0．04％脂肪酸烷醇酰胺溶液(5．4．1)1．0mL，注于25mL比色管中。
8.2.2 将比色管置于70℃恒温水浴锅中，快速加入3，5－二羟基甲苯－硫酸溶液2．0mL，摇匀，继续置于水浴锅中40min，取出，加入0．04％脂肪酸烷醇酰胺溶液(5．4．1)20mL，摇匀，冷却至室温，用0．04 ％脂肪酸烷醇酰胺溶液(5．4．1)定容至刻度。将仪器(6．1)调整好，在425nm波长处测定溶液的吸光值，记录其读数，保留两位小数。
8.3 测定
吸取试料溶液(8．1)1．0mL，注于25mL比色管中。以下按8．2．2步骤进行。
8.4 工作曲线绘制
吸取糖标准工作溶液(5．5．2)各1．0mL，注于25 mL比色管中。以下按8．2．2步骤进行。以吸光值为纵坐标、糖的标准工作溶液浓度(mg／mL)为横坐标绘制工作曲线。
9 试验结果的表述
9.1 计算公式
将试料溶液的吸光值减去空白溶液的吸光值，在工作曲线上查出试料溶液的浓度，按式(1)计算糖的含量：
|
X = |
200c |
×100 |
………………………………(1) |
| 2×1000 |
式中：X——试料含糖率，％；
c——在标准曲线上查得试料溶液中糖的浓度值，mg／mL；
200——预处理试料时所加脂肪酸烷醇酰胺溶液量，mL；
2×1000——试料重量，mg。
所得结果修约至二位小数。以三次试验结果的算术平均值作为该试料的平均含糖率。
9.2 试验报告
试验报告单见附录A。
10 精密度和回收率
10.1 糖密度
本标准方法的标准偏差(S)为0．014。
10.2 回收率
本标准方法的回收率在92％～105％之间。
附 录 A
(提示的附录)
棉花含糖率试验报告单
使用标准方法的名称：
棉样编号： 棉花品种：
棉样来源： 试验日期：
|
试验次数 |
棉花含糖率，％ |
备 注 |
|
1 |
|
|
|
2 |
|
|
|
3 |
|
|
|
平均值 |
|
|
试验员： 复核：
日 期：
